一、上海締倫生物顯微鏡的使用
(一)使用環(huán)境與習(xí)慣
1、使用環(huán)境
顯微鏡的工作場所應(yīng)當(dāng)清潔、干燥、無震動(dòng)、無腐蝕性氣體存在。
2、工作習(xí)慣
(1)臺(tái)面和凳子的高度要適當(dāng)。
(2)鏡檢時(shí),即便用單目顯微鏡,也須兩眼同時(shí)睜開,用左眼觀察。以便右眼繪圖或記錄。如一只眼睜,一只眼閉,眼睛容易疲勞,無法久看。工作時(shí)間較長時(shí),可兩眼輪流觀察。
(二)上海締倫生物顯微鏡使用前的準(zhǔn)備
1、光學(xué)系統(tǒng)的安裝
對新購或已經(jīng)卸掉光學(xué)系統(tǒng)的顯微鏡,使用前必須先將顯微鏡安裝起來。安裝時(shí),為了防止向下掉灰塵,應(yīng)按照先上后下的順序,即按照目鏡、物鏡、聚光鏡、反射鏡的順序來安裝。
安裝物鏡時(shí),應(yīng)先將鏡筒升高或載波物臺(tái)下降,使轉(zhuǎn)換器與載物臺(tái)之間保持一定的距離。然后,握往物鏡,把它放入轉(zhuǎn)換器的螺絲口處,先略向反時(shí)針方向旋轉(zhuǎn),待物鏡配上絲紋后,再按順時(shí)針方向旋入,旋至中等程度松緊即可。安裝物鏡時(shí),應(yīng)根據(jù)物鏡的放大倍數(shù),從小到大順時(shí)針安裝。轉(zhuǎn)換物鏡時(shí),不要用手推著物鏡旋轉(zhuǎn),那樣會(huì)使物鏡的光軸歪斜。好用手捏著轉(zhuǎn)換器的轉(zhuǎn)動(dòng)盤旋轉(zhuǎn),或用手扶著與物鏡轉(zhuǎn)換器銜接處的滾花外圓旋轉(zhuǎn)。
目鏡和物鏡裝好后,再將聚光鏡插入載物臺(tái)下面的聚光器支架內(nèi)。插入的高度應(yīng)使聚光器升至高時(shí),聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺(tái)的平面,以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰。然后,將聚光器的固定螺絲旋緊。對非電光源的顯微鏡來說,后要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內(nèi)。
2、校正光軸
校正光軸的意義在于使物鏡、目鏡、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點(diǎn)重合在一條直線上。所以又叫做合軸調(diào)節(jié)或中心調(diào)節(jié)。如果光軸歪斜,會(huì)使像差增大,分辨率和清晰度都要下降。
檢查方法是將可變光欄開至大,把低倍物鏡旋入光軸,降低鏡筒,使物鏡與載物臺(tái)之間的距離小于該物鏡的工作距離(5mm以下)。不放標(biāo)本,調(diào)節(jié)反射鏡的角度,使視場亮;或調(diào)節(jié)光源燈的亮度,使視場明暗合適。
然后,拔掉目鏡,直接從鏡筒中觀察。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開數(shù)次,當(dāng)光欄關(guān)至小時(shí),光欄的像(此時(shí)只有一點(diǎn)點(diǎn))應(yīng)正好落在物鏡通光孔的中心。當(dāng)光欄開大到一定程度時(shí),光欄孔的像應(yīng)正好與物鏡通光孔的黑圈相重合。若符合上述兩個(gè)條件,說明它們“合軸”。否則,就需要調(diào)整。
目鏡和物鏡都是固定的,無法進(jìn)行調(diào)整。合軸調(diào)節(jié)主要是調(diào)整聚光鏡的位置。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個(gè)光軸校正螺絲,調(diào)節(jié)這兩個(gè)螺絲,即可合軸。另一種聚光器是由框架上三個(gè)相隔120°的螺絲支持住,其中一個(gè)裝有彈簧,可以伸縮;另外兩個(gè)螺絲,可以旋動(dòng)。調(diào)整這兩個(gè)螺絲,便可合軸。
顯微鏡的光軸校正好后,如果沒有拆下聚光器或其它特殊原因,不必經(jīng)常校正。
3、準(zhǔn)備好標(biāo)本
準(zhǔn)備好高質(zhì)量的標(biāo)本備用。
(三)上海締倫生物顯微鏡反射鏡、聚光器的使用方法和對光方法
1、調(diào)光
對采用反射鏡的的顯微鏡,一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時(shí),才使用凹面反射鏡。
采用電光源的顯微鏡,將光亮調(diào)合適即行。
2、聚光器的用法
(1)聚光器高度的調(diào)節(jié) 一般的聚光鏡,在平行光照射的情況下,其焦點(diǎn)落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處。當(dāng)使用高倍鏡或油鏡時(shí),由于放大率大,鏡像亮度小,需要較強(qiáng)的照明。因此,應(yīng)把聚光器升至高,以便使聚光鏡的焦點(diǎn)正好落在標(biāo)本平面上。但在使用低倍物鏡時(shí),可將聚光器適當(dāng)下降。
(2)可變光欄的用法 可變光欄起兩個(gè)作用。一是控制射向標(biāo)本的光通量;二是改變聚光器的數(shù)值孔徑。在這兩個(gè)作用中,后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用,從原則上說,聚光器的數(shù)值孔徑應(yīng)與物鏡的相同。否則,分辨率或清晰度會(huì)受影響。
3、對光方法
對電光源顯微鏡來說,使用時(shí),只要將光調(diào)節(jié)在合適的亮度即行。不需要進(jìn)行對光。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說,要想獲得良好的觀察效果,必須充分利用照明光線。因此,鏡檢之前應(yīng)先對光。對光時(shí),將低倍鏡旋入光軸,聚光器適當(dāng)升高,可變光欄開至大。然后,從目鏡中觀察,同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反射鏡,直至視場明亮、清晰為止。如果利用自然光,則盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾。
(四)上海締倫生物鏡的正確調(diào)焦
對光完成后或調(diào)節(jié)合適光亮后,升高鏡筒或降低載物臺(tái),將標(biāo)本玻片夾在移動(dòng)器即標(biāo)本夾上,并將欲檢查的部分移至載物臺(tái)通光孔的中央,然后開始調(diào)焦。
無論作何種檢查,均應(yīng)從低倍鏡開始。調(diào)焦時(shí),先用粗動(dòng)手輪將鏡筒下降,使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的工作距離(5mm以下)。為了避免物鏡壓在標(biāo)本玻片上,可從側(cè)面窺視。然后,一邊從目鏡中觀察視野,一邊利用粗動(dòng)手輪將鏡筒徐徐上升,待初見物像后,改用微動(dòng)手輪作精細(xì)調(diào)焦,直至物像清晰為至。低倍物鏡的視場大,有利于觀察標(biāo)本的全貌。也可利用移動(dòng)器或縱、橫向調(diào)節(jié)手輪尋覓所觀察的目標(biāo)。如有必要,可將尋得的目標(biāo)移至視場的中心,為高倍鏡觀察作好準(zhǔn)備。
從低倍物鏡轉(zhuǎn)換為高倍物鏡時(shí),如果物鏡是顯微鏡的原配,所用的載玻片、蓋玻片又符合標(biāo)準(zhǔn),一般都可以進(jìn)行“等高轉(zhuǎn)換”。即轉(zhuǎn)換后,只要稍微調(diào)節(jié)一下微調(diào)旋鈕,即可看到清晰的圖像。但油鏡不強(qiáng)求齊焦,好先將鏡筒升高后再轉(zhuǎn)換,后按低倍鏡的調(diào)焦方法重新調(diào)焦。
使用油鏡的方法如下:先將鏡筒升高,取下標(biāo)本玻片,稍稍降低聚光器,并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油(油中不應(yīng)有氣泡。如有,可用小木簽除去),再將標(biāo)本玻片放回原處,把聚光器升高,使載玻片的底面與香柏油接觸。這樣,就完成了聚光鏡的油浸。接著,在蓋玻片上滴上1滴香柏油。然后從側(cè)面窺視,利用粗調(diào)使鏡筒盡量下降,直至油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中(但尚未接觸玻片),這樣,又完成了物鏡的油浸。然后,一邊從目鏡中觀察,一邊利用微動(dòng)手輪將鏡筒緩緩上升(注意不要擰錯(cuò)了方向,壓碎蓋玻片),直至視野中出現(xiàn)清晰的物像為止。
聚光鏡的油浸,還可以采用另一種滴油方法:即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上,而是把載玻片翻過來,將油滴在載玻片的底面上,然后再翻過去,對準(zhǔn)放置于聚光器上面,再使聚光器上升,來完成聚光器的油浸。這種方法雖然不那么順手,但比較安全。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來涂抹香柏油,這種方法容易劃傷鏡片,不宜采用。
在使用油鏡時(shí),允許在聚光鏡與標(biāo)本之間不加香柏油,即聚光鏡上仍以空氣為介質(zhì),但這會(huì)犧牲物鏡的分辨率。
如用油鏡觀察后,如又需要轉(zhuǎn)回高倍物鏡觀察,應(yīng)將蓋玻片上的油擦去,以免沾污高倍物鏡。但聚光器上的油可以不擦,只要把光欄適當(dāng)縮小一點(diǎn)即可。
油鏡使用完畢后,要及時(shí)將香柏油擦拭干凈。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦1——2次,把大部分的油擦掉。然后用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦兩次,后用擦鏡紙擦干凈即行。聚光鏡的擦拭方法與此相同。如標(biāo)本需要保存,玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈。即將擦鏡紙復(fù)蓋在玻片上,在紙上滴上一滴二甲苯,趁濕將紙條平拖著往外拉,連續(xù)幾次即可擦干凈。
后指出:在整個(gè)調(diào)焦過程中(尤其是高倍物鏡和油鏡的調(diào)焦),每個(gè)動(dòng)作都要緩慢進(jìn)行。否則,物像會(huì)一閃而過,找不到觀察的目標(biāo)。
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